A coloração de Gram, método desenvolvido por um médico dinamarquês chamado Hans Christian Joachin Gram em 1884, é um dos mais importantes métodos utilizados na caracterização de amostras bacterianas rotineiramente aplicado em laboratórios/setores de microbiologia. Tabela. Comparação entre resultados de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas de acordo com as etapas de aplicação das soluções da técnica. SOLUÇÕES Gram-positivas (aspecto das bactérias) Gram-negativas (aspectos das bactérias) Cristal violeta Coradas em violeta. Coradas em violeta. Lugol Mesmo após do complexo Cristal violeta – Iodo (Cv-I) no interior da célula permanecem violeta. Mesmo após do complexo Cristal violeta – Iodo (Cv-I) no interior da célula permanecem violeta. Alcool-acetona Diminuição da permeabilidade, porosidade e desidratação da parede celular; retenção do complexo Cv-I mantendo a célula violeta. Extração dos lipídeos da parede celular, aumento da porosidade; remoção do complexo Cv-I da célula. Fucsina/Safranina Permanece violeta Adquire cor vermelha Observe a tabela e as afirmativas a seguir: I- Mycoplasma é um gênero procarionte pertencente a família Mycoplasmataceae de tamanho inferior a grande maioria das bactérias e que não possuem parede celular. II- O método de Gram não leva em consideração a capacidade das paredes celulares durante o tratamento com o solvente orgânico etanol-acetona (1:1 v:v). III- As propriedades químicas e físicas das paredes celulares (densidade, integridade, porosidade e espessura) influem diretamente na capacidade de retenção ou não do corante primário. IV- O papel do solvente, além de dissolver a porção de lipídeos da membrana externa, é desidratar as paredes celulares, contrair os poros do peptideoglicano causando a impermeabilização das mesmas. V- Por fim as Gram-negativas adquirem cor violeta e as Gram-positivas permanecem vermelhas. Agora, assinale a alternativa que apresenta a alternativa correta: